超微量分光光度計(jì)原理是我們從事實(shí)驗(yàn)室儀器研究和應(yīng)用的人員需要掌握的知識。分光光度計(jì)就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。該儀器是實(shí)驗(yàn)室、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、食品廠、飲用水廠等機(jī)構(gòu)*檢驗(yàn)設(shè)備。已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。數(shù)字分光光度計(jì)常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。分光光度計(jì)基本原理是指采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時(shí)，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比。
超微量分光光度計(jì)，就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
1、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素：他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降；造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正。使用紫外分光光度計(jì)應(yīng)具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設(shè)備，特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室。
2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一：因此，使用紫外分光光度計(jì)必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。
3、比例雙光束紫外分光光度計(jì)使用一定周期后，內(nèi)部會積累一定量的塵埃，由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進(jìn)行除塵工作：同時(shí)，將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔，必要時(shí)對光路進(jìn)行校準(zhǔn)，對機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑。zui后，恢復(fù)原狀，再進(jìn)行一些必要的檢測、調(diào)校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護(hù)和對主要技術(shù)指標(biāo)的簡易測試方法，自己經(jīng)常對儀器進(jìn)行維護(hù)和測試，以保證儀器工作在*狀態(tài)。
超微量分光光度計(jì)是精密儀器，正確安裝、使用及保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準(zhǔn)確度具有重要作用。為了保證測試結(jié)果的準(zhǔn)確性及可靠性，新制造、使用中和修理后的分光光度計(jì)都應(yīng)定期進(jìn)行檢定。檢定不合格的儀器還要進(jìn)行及時(shí)調(diào)整。除此之外，分光光度計(jì)的操作步驟都有啥？為了解決使用者的疑惑，更好的保護(hù)分光光度計(jì)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，本次特別介紹分光光度計(jì)，供參考！
超微量分光光度計(jì)的檢驗(yàn)小妙招
1.波長準(zhǔn)確度的檢驗(yàn)：
分光光度計(jì)在使用過程中，由于機(jī)械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因，經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實(shí)際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象，
因而導(dǎo)致儀器靈明度降低，影響測定結(jié)果的精度，需要進(jìn)行檢驗(yàn)。
檢驗(yàn)波長準(zhǔn)確度zui簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值， 如果測出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定， 則需要進(jìn)行波長調(diào)節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗(yàn)：
用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10 %、20 %、30 %左右的光譜中性濾光片，可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。
3.穩(wěn)定度的檢驗(yàn)：
在零點(diǎn)不受光的條件下，用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點(diǎn)，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點(diǎn)穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調(diào)節(jié)零點(diǎn)后，蓋上樣品室蓋（打開光門），使光電管受光，調(diào)節(jié)透射比為95%（數(shù)顯儀器調(diào)至）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗(yàn)：
雙光束分光光度計(jì)棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計(jì)在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。
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更新時(shí)間：2019-09-26
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